Sn. alpay_23; doku kültürü konusunda deneyimleriniz var mı?..

Bildiğim kadarıyla yardımcı olmaya çalışır isem;

1- Bitki doku kültürü ile dut klonlanabiliyor, genellikle MS besi yeri tercih edilir ve besi yerine ek olarak vitaminler, hormonlar, karbon kaynağı (sukrose), ve katılaştırıcı (agar) kullanılır. Kültüre alınacak bitkinin çeşidine göre bu maddelerin konsantrasyonları değişir ancak benim sormak istediğim sterilizasyonu nasıl yapacaksınız, ya da yapıyordsunuz??
2- Evet kullanabilirsiniz.
3- MS besi yerinin pH ayarını 1 ve 0.1 N KOH ve HCL ile yapmak önerilse de amatör olduğunuz söylemini göz önüne alıp asidik durumda az bir miktar karbonat bazik durumda sitrik asit kullanmanız uygundur. Suda önceden bir çözelti hazırlamanıza gerek yok.
4- Evet, bildiğiniz toz şeker(çay şekeri) otoklavdan önce katmanız gerekli. Nedeni ve ne için böyle olduğu konusuyla ilgili biyokimyasal reaksiyonları isterseniz sonra yazarım.
5-IBA yerine köklendirici hormon diye satılan saf IBA içeren toz karışımlardan kullanamazsınız. Ama zaten amacınız amatörce bir deney, gözlem yapmaksa neden olmasın? IBA her bitki sınıfının kültüvasyonu için farklı derişimlerde µM kullanılır, IBA yı ne için ve hangi bitkide kullanacaksınız, bitkiler dokuda büyüdü de aklimizasyon aşamasına mı geçecekler??
6- Bap nedir derken ne işe yaradığı mı molekül yapısı mı anlamadım doğrusu?
7- Kültür kaplarınızdan yaklaşık 40 cm üzerinde daylight florasanlar işinizi görecektir.
8,9- Elinizdeki tabletin yarısını 1 litre besi yerinde eriterek (otoklavdan önce) kullana bilirsiniz.
10-Kısaca besi yerinde bitki tarafından salgılanan bileşikler diyebilirim.
11-Bilmiyorum.
12-Steril toprağa gerek yok.

Ben açıkçası yeni başlayan/başlayacak olan birinin IBA veya MS e değil de kullanacağı özeğin nasıl steril edeceğine nasıl bir ortamda ekim yapacağına, en basitinden alkol su oranına kafa yoracağını sanıyorum, bunu direkt sizin için söylemiyorum sonradan bu mesajları okuyan ve bu konuya ilgi duyanlar için de, bu tür, bir baştan bir sondan sorular konunun anlaşılmasını çok sancılı kılacaktır, benim kanaatim bu yönde.

Sn. alpay_23 sormak çok güzel lakin özellikle bu konuda yaptığınız/yapacağınız bir çalışmanın eş zamanlı fotoları ve yaptıklarınızı paylaşıp, karşılaştığınız sorunlar üzerinden muhakeme yapmak hem sizin hemde daha sonrasında konuyla ilgili olanlar için çok daha faydalı olacağı kanısındayım. Umarım yardımcı olabilmişimdir.
Saygılar.

Hocam yorumlarınız için çok teşekkür ediyorum. kendi imkanlarım ölçüsünde kurduğum mini bir laboratuvarım var. Hepa filtreli sterilizasyon cihazım, saf su, alkol, çeşitli besiyerleri ve laboratuvar ekipmanlarım mevcut. Aşılama, transfer gibi konularda herhangi bir sterilizasyon sorunum yok. Bitki materyallerini çamaşır suyu alkol saf su ile yapıyorum. Yazdığınız tüm yorumları da okudum. merak ettiğim konular da yukarıdaki konulardı. Sadece bir kaç sorum daha olacak sizi sıkmadıysam. Daha önce bir kez deneme yaptım. fakat bitki meteryallerinin sterilizasyonunda sorun çıktı. olmadı ben de imha ettim. şimdi bir deneme daha yaptım. kavanozlardan bazılarında bulaşıklık oldu ama bazıları hala temiz. Hatta Bir kavanozun içine yerleştirdiğim gül ve böğürtlen çelikleri yeşermeye başladı bile. gülde köklenme de olmaya başladı. en kısa zamanda fotoğraflarını da yükleyeceğim. teşekkür ederim

Sterilizasyon sorunum var yardım edin.
 

1-Petri kabındaki tohumlar dut tohumu... Alkol ve saf suda sterilize etmeye çalıştım olmadı. Tohum sterilizasyonu için ne yapmalıyım?
2- kavanozlarda gül, dut ve mahlep var. Bunları da çamaşır suyuyla sterilize etmeye çalıştım olmadı. Sterilizasyon için ne yapmalıyım? başka bir yöntem var mı?
3- Fotoğraflar net değil fakat yeşermeler başlamış durumda. Bulaşıklık olduğu için bu kavanozları yeşermelere imha edeyim mi?
4- Önceki sayfalarda belirtilen evde doku kültürü çalışmasının çıktısını alıp okudum. Buna rağmen sterilizasyon sorununu tam anlamıyla çözemedim. Lütfen yardım edin.

Hocam ne yazık ki kontamine olmuşlar yok edin kullanmayın zira başka yerlere de bulaştırırsınız.

Sterilizasyon için çamaşır suyu genel anlamda en çok kullanılanı. Çamaşır suyunun taze olmasına dikkat edin(2-3 saat içerisinde çamaşır suyu etkisini kaybeder), bir de su ile seyretme yaptınız mı o önemli. Ben olsam 1-2 dakika alkol (yüzde 70lik) sonrasında çamaşır suyu kullanırdım.

Odunsu bitkilerde sterilizasyon sıkıntıdır ben bazen civa kullanıyorum bu yüzden. Ancak çok tavsiye edeceğim bir prosedür değil.

Sterilizasyon süresini uzatmak ve çamaşır suyu ile steril ettiğiniz kaba bir kaç damla tween (bulamazsanız bulaşık deterjanıda güzel iş görür) atmak sorunu çözebilir.

Sn.alpay_23 mantar üretimi kesikli pastörizasyon koşullarında doku kültürü sürekli sterilizasyonda başarılı olur.
1 ortam sterilizayonu
2 bitki sterlizasyonu
3 steril aktarım
bunları sağlayamassanız olmaz
amatör olduğunuzu unutmayın çamaşır suyun dan başka bişey aramayın.Sn.Ankafarın söylediği gibi basit bitkiler çalışın.

bitkilerinizide kavonoz ile kaynatarak imha edin.bitkilerinizde hem bakteri hem mantar var.güllerde ise en az iki farklı mantar ve bakteri var...

Sayın LUDİSA EXCELLENCE;
Çalışmalarınızda başarılar diliyor ve tebrik ediyorum. Sekiz aylık olan catleya ların satışını yaparmısınız (İki üç adette olsa)? Zira kurmuş olduğum Terrarium için böyle küçük orkidelere ihtiyacım var.

SAYGILARIMLA.

Merhaba sayın sagen, çalışmalarım ticari olmadığından dolayı böyle bir satış vs. söz konusu değil, şartlar olgunlaşınca paylaşa bilirim tabi hem bende terr. da gelişimlerini görmüş olurum.
Selamlar.

Bu paylaşım ne zaman olabilir sayın ludisa...

Evde Besi Yeri Hazırlama
 

Arkadaşlar evde orkide tohumu çimlendirmek için besi yeri hazırlayabilirmiyiz ? hani şöyle kek tarifi yapar gibi :-).. Bir de Orkidenin keiki vermesini sağlamak için NAA horrmonunu (toz formu) vazelin ile karıştırarak kullanabilirmiyiz?

Buradaki yazılanlar bana doku kültürü hakkında oldukça yararlı oldu. Özellikle orkide tohumu çimlendirme konusunda bana faydalı oldu. Enbüyük sıkıntı besi yeri temin etme konusu. Malesef besi yeri yurt dışından temin edilebiliyor bu konuda yerli besi yeri satışı yok sanırım. Benimde deneme şansım olmadı. Doku kültürü ile ilgili çeşitli besi yerleri hazırlamak istiyorum. Bu konuda 3 aydır hazırlık yapıyorum. besi yerinde kullanılan gerekli malzemelerin çoğunu temin ettim. eğer fotoğraf yüklemeyi becerebilirsem yakında bu çalışmaları sizinle paylaşaağım inşaallah

Doku kültürü çalışması yapan arkadaşlar neredeler?

İyi günler. Bitki doku kültürü alanında çalışmalar yapıyorum. Ticari boyuta dökme fikrim var. Sizce hangi bitkiler bu açıdan avantajlı olur? fikir verebilirseniz çok sevinirim. Şimdiden teşekkür ederim.

Öncelikle şunu bilmenizde fayda var: Doku kültürü amatörce uğraşanlar için iyidir, eğlendiricidir. Profesyonel aşamaya geçtiğinizde, sürekli bitki dikimi ortam hazırlığı insanının motivasyonunu kırar, dikim performansınız giderek düşer. Ben şansımı deneyeceğim diyorsanız;

1. Steril çalışma kabininizi (HEPA filtreli kabin) kendiniz yapın. Satın almak 2017 Haziran ayı fiyatıyla 30000TL. Oysa, Ulpatek firmasından 53 Euro'ya alabileceğiniz bir HEPA filtre ve bu filtreye ön filitre olarak yerleştireceğiniz kaba filtre + salyangoz fan işinizi görür. http://www.agaclar.net/forum/1439938-post125.htm
Kabin malzemesi olarak pleksiglas, lamine edilmiş ahşap veya cam kullanabilirsiniz.
2. Otoklav, sanayide 316L kalitede paslanmaz çelikten yaptırabilirsiniz. Veya, endüstriyel tip düdüklü tencere kullanabilirsiniz. Ancak, tencereyi modifiye etmeniz gerekiyor. Sıcaklığın 121 °C'ye çıkartmak için ya elektronik bir sistem almanız veya emniyet çalışma ventilini çıkartıp yerine ikinci bir emniyet ventili takmanız gerekiyor.
3. Süs bitkileriyle başlamayın. Evet, özellikle afrika menekşesi, kalanchoe oldukça kolay yetişir, ama satabilme şansınız oldukça az. Bu nedenle, meyve anacı üretin. Meyve anacında da rakipleriniz olduğu için oldukça zorlanacaksınız. Akvaryum bitkisi olabilir (eskiden çalıştığım laboratuvarın ilk satışı akvaryum bitkisi olmuştu anubias türleri veya cyriptocoryne türleri) veya botanik tür orkide üretebilirsiniz. Botanik tür orkideleri çiçeklendirmeden satabilmeniz biraz zor, bitkileri tanıtmanız gerekiyor. Phalaenopsis bile doku kültüründen çıkarıldıktan 15 ay sonra çiçeklenme aşamasına geliyor. Mücevher orkide denilen bir orkide gurubu var. Bildiğiniz yaprak güzelinin orkide versiyonları. Bundan yetiştirebilirsiniz, üstelik çiçeklendirme zorunluluğunuzda yok.

Kolay gelsin....

verdiğiniz cevap için teşekkür ederim. Benim laboratuvarım hali hazırda kurulu aslında. kabin, otoklav, ph metre, hassas terazi gibi cihazlarım mevcut. ben çalışacak bitkiler konusunda kararsızlıklar yaşıyorum :confused:. bir kaç bitki denedim ama satışlarda sıkıntılar yaşadım. Anaç bitkiler üzerinde çalışmalara başladım süs bitkileri düşünüyordum ama dedikleriniz çok mantıklı. akvaryum bitkilerinde de çalıştım ama çok fazla kontaminasyon yaşadım. çalışmalarımı tekrarlayacağım inşallah.

Arkadaşlar merhabalar önemli bir soru soracağım ben doku kültürü için besiyerini oluşturdum daha dün biraz beklemem gerektiğini söylemişlerdi eğer hala kontamine olmadıysa öyle orkide tohumlarını ekelim demiştik sorum şu : besiyerini bekletirkeb karanlık ortamda mı beklemeli aydınlık ortamda mı ? Biraz acil denebilir bir soru ona göre yerini değiştireceğin şuan karanlıkta duruyor çünkü normalde besiyerini karanlık alanda muhafaza ediyorlar diye okumuştum

Lütfen cevaplarınızı yazın ki bilgileneyim :D dediğim gibi ne kadar erken cevap o kadar iyi şimdiden cevaplayan arkadaşlara teşekkür ederim iyi akşamlar :)

Karanlıkta beklet. Tohumları ektikten sonra da 1 hafta karanlıkta tut. (Bazı türlerde ışık, tohum çimlenmesini geciktiriyor). Sonra ışıklı ortama al. 16 saat aydınlık 8 saat karanlık uygula.

Kolay gelsin...

Teşekkür ederim cevabınız İçin ;) gelişme gerçekleşirse paylaşacağım ph kağıdı buldum ama sonucuna çok güvenmiyorum umarım tutar

Herkese tekrardan merhabalar yaptığım besiyeri evsel olduğundan içinde domates de bulunuyor çekirdeklerin ayrılması söylenmişti bende olabildiğince ayırmıştım ama demekki kaçmış birkaç tane bugün besiyerini yaptığımın 6. Günü ve henüz kontamine belirtisi yok pazar günü ekeceğim ancak sorum şu o domates filizi zarar verir mi onu almam gerekir mi yoksa kalsa da olur mu? Şuan medyanın en altında kavanozun tabanında almam pek mümkün değil


İkinci sorumsa şu: medyaları bölüştürüdğüm kavanozlardan biri düdüklü tencereye sığmadığından basınçlı alanda pişmedi ancak 6. Günün sonunda bile kontamine olmadı bu kavanozu kullanmak sakıncalı mı ? Kullanayım mı kullanmayayım mı


Cevaplayanlarq şimdiden teşekkür ederim eğer çimlendirmeyi başarırsam foruma fotoğrafları yüklerim iyi akşamlar ;)

Çekirdek o kadar pişmesine rağmen canlı ve çimlenme başlangıcında

Çekirdek çimlenebiliyorsa, sterilizasyon başarısız olmuş demektir. Küf ve bakteri sporları domates çekirdeğinden çok daha dayanıklıdır.

Kullanma.

12 gün oldu daha 2 gün önce ektim baktığımda hşçbir kontamine belirtisi yoktu baktığımda sanırım çekirdek ilk başta çimlenöe başlangıcımdaydı... yani meyve içindeyken bir gelişim göstermedi olduğu gibi duruyor

American hybrid hanım terliği orkidesi tohumlarını
Ve cattleya tohumlarını ektim tahmini ne kadar sürede çimlenirler ve tohumları az az kavanozlara böldüm yani baya baya az şekilde uzun süre dursa olur mu medya yenilemeden

Hanım terliği orkide tohumları 56 gün ila 180 gün arası bir sürede çimlenebiliyorlarmış. Cattleya mendelii türü tohum çimlenme süresi için 120gün bildiriminde bulunulmuş. Uzun süre dursa bir sorun çıkmaz.

Cattleya blc yazıyor ve bu kadar uzun süreceğini düşünmemiştim :(

Yıllar önce, Amerikan Orkide Tohum Bankası projesini yürüten Aaron Hicks'e, rastladığı en uzun süreli çimlenmenin ne karada olduğunu sormuştum. "Üç yıl" demişti. Zaman içerisinde ortamın su kaybettiğini, zaman zaman ortama steril saf su ilave ettiğini söylemişti.

Sabretmek gerekiyor...

Ne türmüş bu mübarek çimlenmesi bile ne kadar sürüyor

merhabalar herkesee bir sorum olacaktı benim 3 ağustosta yaptığım bir evsel besiyerim var 10 ağustosta ektim tohumlarımı . bugün baktığımda besiyerlerinin üst kısımlar (yalış anlaşılmasın kaymak gibi değil direkt besiyerinin ta kendisi) sarı-kırmızı-kahve tonlarında bir renk almış sebebi ne olabilir ? içerisinde kontaminasyon belirtisi yok ama renk değişimi gözlemleniyor



besiyerlerini otoklavladıktan 15 dakika sonra açıp kapağını kapattım ve hala içinde kaynıyordu. sopumadan kapatmamın besiyerinde bozulmaya neden olmuş olabilir mi ve bu renk değişiminde bir zarar söz konusu mu? yani kültürlerin içinde gelişim devam edebiir mi? sanırım 2 ay kadar bekleteceğim ki bu phall tohumlarının çimlenme süresini bile aşıyor aslında

15 dakika sterilizasyon sonrası kavanoz kapağını kapatmışsın, doğru mu?
Eğer öyleyse, sterilizasyon hatası yapmışsın. Ortam sıcak olarak kavanozlara doldurulur. Kapak kapatılır, kavanoz bu şekilde hızlıca karıştırılır. Kapak açılır, sıcak buharın çıkması sağlanır ve tekrar kapatılır. Otoklava ya da düdüklü tencereye yerleştirilir ve sterlize edilir. Soğuyunca kullanılır.

şu şekilde yaptım ilk önce besiyerini ocakta kaynayana kadar pişirdim sonra hemen kavanozlara bölüp kapağı sıkıca kapatılmadan düdüklü tencereye aldım yaklaşık 30-40 dakika kaynadı düdüğü indirip 15 dakika düdüklü tenceririn basıncının dengelenmesini bekledim. en son kapağını açıp olduğu gibi kapattım yani geçen denememde de aynısını yapmıştım fakat hiçbir sorun olmamıştı

Sayın bilgili kişiler öerhaba tekrardan. Bugün 4. Denememin 19. Günü ve artık incelediğimizde tohumlar belirgin şekilde gözle seçilebiliyot. Ayrıca tohumlar kahverengiylen şimdi beyaz gibiler fotoğrafları koyuyorum mümkünse yorumlarınızı rica edeceğim

Şimdiden görüşleriniz için teşekkür ederim görüşleriniz ve önerileriniz benim için çok kıymetli.

(İkinci fotoğraftaki küf değil sadece medya cama bulaşmış )

Tohumlar canlı değil gibi...

Nasıl değil ki :( bu yeni hasattan elde edilen tohumlardı

Geçen yıllarda Avustralya'dan FedEX'le hızlı şekilde tohum getirtmiştim. 1-2 adet ancak çimlendi. Bunun tersine, Tayland'dan getirttiğim tohumların çok büyük bir kısmı çimlenmişti (üstelik, tohumlar adi posta ile gelmişti).
Saklama koşulları önemli. Yine de bekle, çimlenen tohumlar olur.

Tamam teşekkür ederim bilgiler için ;) zaten ben iki ay kdar bekleyeceğim en az

Şeyi merak ettim ölü diye düşünsüğünüz tohumları nasıl anladınız yani ayırt ettiniz ? Kabarmayanlar mı mesela

Çoğu tropik orkide türü çimlendiğinde yeşil renk alır.

Anladım teşekkür ederim. Şuan sanırım kabarma aşamaaında diye düşünüyorım zaten 2 ay kadar bekleyeceğim gelişim olmazsa artık atacağım

Merhabalar tekrardan biraz bitki kültürlerimi inceledim bugün ilk fotoğrafta sanki tohumdam mikro boyut bir kök yaptığını düşünüyorum öyle yorumladım. Tabi yorumlayacak bilgili kişilerin fikirlerini merak ediyorum ;)

İkinci olarak bir video var video biraz uzun ve çok net değil lütfen kusura bakmayın ancak çektim :( videoda ekran parlaklığını azaltarak tohumları incelemeyi denedim vr sanki tohumların bir kısmının şeffaf , diğer kısmının da krem-yeşil gibi olduğunu gördüm. Burası çimlenmeye başlamış embriyo kısmı olabilir mi? Yani dediğim gibi kendi kendime bu şekilde düşünüyorum ama işin ehli kişilerden yorumlarını tez vakitte bekliyorum ;) umarım dönüşleriniz olumlu olur :D bayadır deniyorum artık ;)

Herkese iyi akşamlar